在堿性條件下，細胞內堿性磷酸酶可使萘酚AS-BI磷酸鹽水解，釋放出磷酸與萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯生成不溶性有色偶氮染料沉淀，定位于細胞質中。
陽性反應主要見于成熟中性粒細胞（桿狀及分葉粒細胞）中，健康成人一般的中性粒細胞堿性磷酸酶積分為30～130。
堿性磷酸酶（NAP）陽性顆粒為藍色。
判斷標準：
0分（-）：細胞漿中無陽性染色顆粒；
1分（+）：細胞漿中含少量或成彌漫淺藍色；
2分（2+）：細胞漿中含中等量顆?；虺蕪浡{色；
3分（3+）：細胞漿中含較多顆?；虺蕪浡^深藍色；
4分（4+）：細胞漿中充滿粗大顆粒或呈彌漫深藍色。
